Die Zweifarbfledermaus ist reichlich buchfinkgroß mit einem Gewicht von etwa 12-20,5 Gramm. Sie hat eine schwarzbraune Oberseite und silberweiße Haarspitzen. Die Bauchseite ist weißgrau gefärbt. Die Flügel sind dunkelbraun, die Ohren sind kurz und breit.
Zweifarbfledermaus - Foto: Walter Wimmer
Wochenstuben und Männchenquartiere finden sich in Dachkästen, Spalten und Ritzen in und an Gebäuden, im Winter in Mauerspalten von Gebäuden, in Höhlen und Gewölben. Zwillingsgeburten sind die Regel.